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FAQ

Cette section contient les questions les plus fréquemment posées à propos du test N-LightTM L. monocytogenes. Si l’information que vous cherchez n'est pas traitée ici, veuillez nous contacter à l'adresse suivante techsupport@nemistech.com.

N-Light™ L. monocytogenes est un test qualitatif pour la détection rapide de Listeria monocytogenes, une bactérie pathogène d’origine alimentaire. Le test est destiné à être utilisé sur les sites de production et de transformation des aliments, dans le cadre d’un programme de surveillance environnementale. Étant intuitif, rapide, facile à effectuer, il offre une solution avec un excellent rapport coût/efficacité pour renforcer votre processus de gestion de la qualité.

Le test combine d’une part les avantages de l’AquaSpark®*, une molécule chimiluminescente ultrasensible qui réagit avec l’enzyme PI-PLC produite spécifiquement par Listeria monocytogenes, et d’autre part de la technologie propriétaire bactériophages NEMIS. En pratique, l’utilisateur suit un protocole simple : prélever un échantillon à l’aide d’un écouvillon, le transférer dans le tube d’enrichissement, incuber pendant 24 heures et libérer la pastille AquaSparkTM. Si des Listeria monocytogenes sont présentes, elles vont initier une réaction qui génère de la lumière qui sera mesurée par le luminomètre, donnant ainsi un résultat présumé positif.

(*) AquaSpark® est une marque de commerce de Ramot à l’université de Tel Aviv.

Les résultats peuvent être obtenus dès 24 heures après le prélèvement.

Le test est spécifique à toutes les Listeria monocytogenes, la seule souche pathogène pour l’homme. Un résultat présumé négatif sera obtenu si toute autre espèce de Listeria estprésentedans l’échantillon.

Le test est suffisamment sensible pour détecter L. monocytogenes à partir d’une seule bactérie présente dans l’échantillon. Une bonne pratique de l’écouvillonnage et le suivie des instructions d’utilisationsont nécessaires.

Non. Le mécanisme de détection repose sur l’hydrolyse de l’AquaSparkTM par une enzyme qui n’est exprimée que par les Listeria monocytogenes vivantes. Par conséquent, un résultat présumé négatif sera obtenu pour les bactéries mortes.

OUI, des recherches préliminaires ont démontré que le test détecte les Listeria monocytogenes dans leur état potentiellement virulent VBNC et les differencie des cellules mortes dans des échantillons de laboratoire. D’autres recherches sont en cours pour valider ces résultats sur des échantillons prélevés sur le terrain. 

Le test est conçu pour être réalisé sur place sans aucune infrastructure de laboratoire.

OUI, N-LightTM L. monocytogenes a été certifié par le programme AOAC® Performance Tested MethodsSM et validé par rapport à la méthode de référence ISO 11290-1:2017. Le certificat AOAC peut être téléchargé ici.

Les échantillons sont relevés de préférence sur les points critiques qui indiquent avec précision une contamination potentielle du produit. Veuillez-vous référer à votre plan d’analyse des risques et de maîtrise des points critiques (HACCP).

Une représentation visuelle de la manière de prélever efficacement un échantillon se trouve iciEn bref, humidifiez un écouvillon avec une solution tampon (fournie avec les écouvillons) et frottez-le sur une zone de 10 x 10 cm tout en faisant tourner l’écouvillon pour recueillir la quantité maximale d’échantillon. Appliquez une légère pression pour pénétrer les biofilms s’ils sont présents. Veillez à ce que l’écouvillon n’entre en contact qu’avec la zone d’intérêt afin d’éviter toute contamination croisée.

Des études quantitatives ont démontré une augmentation des quantités d’échantillons prélevés par des écouvillons pré-humidifiés (PMID : 20392914 ; e105786). Seuls les écouvillons pré-humidifiés ont été évalués par l’AOAC et validés par NEMIS. L’échantillonnage des zones humides avec des écouvillons secs doit être revalidé sur le site de l’usine.

Nous recommandons de commencer le test immédiatement après l’échantillonnage. Autrement, les échantillons peuvent être stockés à 4 °C et testés dans un délai de 4 heures, conformément à la norme ISO 18593:2018.

En cas d’un résultat présumé positif , vous pouvez effectuer une confirmation sur une boite de gélose Listeria ou bienenvoyer le tube à un laboratoire externe en utilisant une procédure d’envoi UN3373. En principe, le test N-LightTM L. monocytogenes peut également être confirmé par PCR ou par des réactions immunogènes.

Contactez-nous pour obtenir une liste des méthodes de confirmation validées.

Pour le contrôle négatif, veuillez suivre les étapes suivantes:

  • Activer un test N-LightTM monocytogenes contenant uniquement le bouillon d’enrichissement sans échantillon. Agiter jusqu’à ce que le comprimé soit dissous.
  • Incuber à 37°C pendant 10 minutes (Incubateur NEMIS).
  • Tester avec le luminomètre 10 minutes après l’activation.
  • Des résultats jusqu’à 10.000 RLU sont acceptables. En cas de valeurs plus élevées, contacter techsupport@nemistech.com pour plus d’informations.

Contrôle positif : Développement en cours.

AquaSparkTM sont des dérivés de dioxétane portant des substrats qui réagissent de manière spécifique avec les enzymes cibles. S’agissant de molécules synthétiques, la plate-forme offre un large éventail de variations qui permettent de détecter rapidement les activités enzymatiques, entre autres applications. Des informations supplémentaires sur la technologie AquaSparkTM sont ici. Consultez nos autres publications.

Afin d’offrir un milieu de culture idéal pour Listeria monocytogenes conduisant à une sensibilité et une spécificité supérieures du test, le bouillon d’enrichissement exclusif de NEMIS contient des substances sélectives, notamment des bactériophages, ainsi que des nutriments stimulants. Sa formule unique inhibe la croissance des bactéries concurrentes et rend le test plus fiable dans les environnements difficiles. Des données supplémentaires sur le bouillon d’enrichissement sont disponibles ici.

COMMENT UTILISEZ-VOUS LE
N-LightTM Listeria MONOCYTOGENES

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